产品货号：
BTN13-39800
中文名称：
大肠杆菌(含致病性和非致病性)PCR试剂盒
英文名称：
E.coli PCR Kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本产品是根据PCR原理开发的大肠杆菌通用检测试剂盒。
大肠杆菌（Escherichia coli）为埃希氏菌属（Escherichia）代表菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。但某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌，又叫致泻性大肠杆菌（Diarrheagenic Escherichia coli，DEC）根据致病性的不同，这些致泻性大肠埃希菌被分为五种。检测致病性和非致病性大肠杆菌是食品行业（包括饮用水）的一个重要的安全指标，因此快速检测致病性和非致病性大肠杆菌具有重要意义。
试剂盒特点：
1．即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2．引物经过精心优化，专一性强，只扩大肠杆菌，与其他病原没有交叉反应。
3．提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4．PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5．本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
试剂盒组成：
使用方法：
一、样品DNA的制备
1．用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2．如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL大肠杆菌通用PCR阳性对照的100倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。
二、设置PCR反应（40μL体系）
3．对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
4．按下表设置PCR反应：
三、电泳检测
5．取10-20μL PCR产物。2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。阳性对照必须有83bp大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
相关搜索：大肠杆菌(含致病性和非致病性)PCR试剂盒，大肠杆菌PCR检测试剂盒，E.coli PCR Kit
大肠杆菌（Escherichia coli）为埃希氏菌属（Escherichia）代表菌。一般多不致病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。但某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌，又叫致泻性大肠杆菌（Diarrheagenic Escherichia coli，DEC）根据致病性的不同，这些致泻性大肠埃希菌被分为五种。检测致病性和非致病性大肠杆菌是食品行业（包括饮用水）的一个重要的安全指标，因此快速检测致病性和非致病性大肠杆菌具有重要意义。
试剂盒特点：
1．即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2．引物经过精心优化，专一性强，只扩大肠杆菌，与其他病原没有交叉反应。
3．提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4．PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5．本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
试剂盒组成：
| 组分 | 规格 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1mL（红盖） |
| 超纯水 | 1mL（亮黄色） |
| 大肠杆菌通用PCR引物混合液 | 100μL（白盖） |
| 大肠杆菌通用PCR阳性对照（1×108 拷贝/μL） | 50μL（黄盖） |
使用方法：
一、样品DNA的制备
1．用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2．如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL大肠杆菌通用PCR阳性对照的100倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板DNA放冰上待用。
二、设置PCR反应（40μL体系）
3．对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成分 | N+2个样品管 | PCR阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各20μL | 20μL | 20μL |
| 大肠杆菌通用PCR引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | - | - |
| PCR阴性对照（水） | - | 18μL | - |
| PCR阳性对照（大肠杆菌通用PCR阳性对照的100倍稀释液） | - | - | 18μL |
4．按下表设置PCR反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5min |
| PCR反应（35个循环） | 95℃ | 30sec |
| 60℃ | 30sec | |
| 72℃ | 10sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 7sec |
三、电泳检测
5．取10-20μL PCR产物。2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。阳性对照必须有83bp大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
相关搜索：大肠杆菌(含致病性和非致病性)PCR试剂盒，大肠杆菌PCR检测试剂盒，E.coli PCR Kit